Naujas koronaviruso (SARS-CoV-2) daugialypis realaus laiko PGR rinkinys
Šis labai jautrus, paruoštas naudojimui PGR rinkinys yra liofilizuotas (džiovinamas šalčiu), skirtas ilgalaikiam saugojimui.Rinkinį galima transportuoti ir laikyti kambario temperatūroje, jis yra stabilus vienerius metus.Kiekviename premikso mėgintuvėlyje yra visi reagentai, reikalingi PGR amplifikacijai, įskaitant atvirkštinę transkriptazę, Taq polimerazę, pradmenis, zondus ir dNTP substratus.Tereikia įpilti 13 ul distiliuoto vandens ir 5 ul ekstrahuoto RNR šablono, tada jį galima paleisti ir sustiprinti PGR prietaisais.
qPCR aparatas turi atitikti šiuos reikalavimus:
1. Sumontuokite 8 juostelių PGR mėgintuvėlį, kurio tūris yra 0,2 ml
2. Turėkite daugiau nei keturis aptikimo kanalus:
Kanalas | Sužadinimas (nm) | Išmetimas (nm) | Iš anksto sukalibruoti dažai |
1. | 470 | 525 | FAM, SYBR Green I |
2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
3. | 571 | 621 | ROX, TEXAS-RED |
4 | 630 | 670 | CY5 |
PCR platformos:
7500realaus laiko PGR sistema, Biorad CF96, iCycler iQ™ realiojo laiko PGR aptikimo sistema, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Naujojo koronaviruso nukleorūgščių aptikimo reagento šaltosios grandinės transportavimo sunkumai
Kai įprasti nukleorūgščių aptikimo reagentai gabenami dideliais atstumais, reikalingas (-20±5) ℃ šaltosios grandinės saugojimas ir transportavimas, kad fermento bioaktyvumas reagentuose išliktų aktyvus.Norint užtikrinti, kad temperatūra pasiektų normą, kiekvienai nukleorūgščių tyrimo reagento dėžutei reikia kelių kilogramų sauso ledo, net mažiau nei 50 g, tačiau jo gali pakakti tik dvi ar tris dienas.Pramonės praktikos požiūriu tikrasis gamintojų išleistų reagentų svoris yra mažesnis nei 10 % (arba daug mažesnis už šią vertę) talpyklos.Didžiąją dalį svorio sudaro sausas ledas, ledo paketai ir putplasčio dėžės, todėl transportavimo kaina yra labai didelė.
2020 m. kovo mėn. COVID-19 pradėjo plisti užsienyje, o naujojo koronaviruso nukleorūgščių aptikimo reagento paklausa smarkiai išaugo.Nepaisant didelių šaltosios grandinės reagentų eksporto sąnaudų, dauguma gamintojų vis tiek gali juos priimti dėl didelio kiekio ir didelio pelno.
Tačiau tobulinant nacionalinę antipandeminių produktų eksporto politiką, taip pat tobulinant nacionalinę žmonių srauto ir logistikos kontrolę, pailgėja reagentų transportavimo laikas ir atsiranda neapibrėžtumo, todėl iškilo rimtų gaminių problemų. per transportą.Pailgėjęs transportavimo laikas (labai dažnas gabenimo laikas apie pusę mėnesio) lemia dažnus gaminio gedimus, kai prekė pasiekia klientą.Tai sukėlė problemų daugeliui nukleorūgščių reagentus eksportuojančių įmonių.
Liofilizuota PGR reagento technologija padėjo transportuoti naujojo koronaviruso nukleorūgščių aptikimo reagentą visame pasaulyje
Liofilizuoti PGR reagentai gali būti transportuojami ir laikomi kambario temperatūroje, o tai gali ne tik sumažinti transportavimo išlaidas, bet ir išvengti transportavimo proceso sukeliamų kokybės problemų.Todėl reagento liofilizavimas yra geriausias būdas išspręsti eksporto transportavimo problemą.
Liofilizavimas apima tirpalo užšaldymą į kietą būseną, o po to sublimuojant ir atskiriant vandens garus vakuume.Išdžiūvusi medžiaga lieka talpykloje, kurios sudėtis ir aktyvumas yra tokios pat.Lyginant su įprastais skystais reagentais, viso komponento liofilizuotas Novel Coronavirus nukleorūgščių aptikimo reagentas, pagamintas Liming Bio, pasižymi šiomis savybėmis:
Itin stiprus šilumos stabilumas:apdorojus 56 ℃ temperatūroje, jis gali stovėti 60 dienų, o reagento morfologija ir veikimas nesikeičia.
Normalios temperatūros laikymas ir transportavimas:nereikia šaldymo grandinės, nereikia laikyti žemoje temperatūroje prieš atimant, visiškai atlaisvinkite šaldymo vietą.
Paruoštas naudoti:visų komponentų liofilizavimas, nereikia sistemos konfigūracijos, išvengiama didelio klampumo komponentų, tokių kaip fermentas, praradimo.
Multipleksiniai taikiniai viename vamzdyje:aptikimo taikinys apima naują koronaviruso ORF1ab geną, N geną, S geną, kad būtų išvengta viruso genovariacijos.Siekiant sumažinti klaidingai neigiamą skaičių, žmogaus RNazės P genas naudojamas kaip vidinė kontrolė, kad būtų patenkintas klinikinis mėginio kokybės kontrolės poreikis.